在国标GB5009.22—2016措施1：同位素稀释液相色谱-串联质谱法的酿酒根基上妨碍了措施优化、改善，质料建树了酿酒质料及白酒中黄曲霉毒素B1（AFTB1）的及白酒中合成措施。样品经甲醇∶水（7∶3）提取后，黄曲传染稀释液由TritionX-100的霉毒PBS改为超纯水，黏度变小、素B施改善易于经由萃取小柱。测定措行动相改为甲醇以及0.02%甲酸-2妹妹ol／L乙酸铵，酿酒后退了照应强度。质料梯度洗脱，及白酒中经高效液相色谱分说，黄曲在ESI正离子方式下扫描，霉毒妨碍多反映监测方式（MRM）检测。素B施改善

服从表明，测定措仪器详尽度精采，酿酒差距浓度标液相对于尺度倾向（RSD%）均<6%；所绘制校准曲线线性关连精采，0.05～10µg／L规模内关连系数r值>0.999；措施定量限为0.05µg／kg，检出限<0.01μg／kg，均低于其余检测措施。质料与白酒的加标接管率都在90%～105%，残缺适宜要求。此措施检出限低、精确度高，增强了企业对于AFTB1的严厉监控。

白酒酿造质料主要有高粱、大麦、小麦、豌豆等，因酿酒质料用量较大，酒厂艰深对于质料批量置办，妨碍存储运用，一旦置办质料存在清静隐患或者存储不妥组成霉变，将发生一些对于人体有害的霉菌毒素类物资，其中黄曲霉毒素B1（AFTB1）对于人体瘦弱的危害最大，为强毒性、强致癌性物资，已经被天下卫负气关癌症机构（IARC）参加一级致癌物。

为了严厉操作黄曲霉毒素对于人体的危害危害，从而保障破费者的清静，美国、日本、加拿大等多个国家已经宣告了无关黄曲霉毒素最大限度量的纪律，我国GB2761—2017《食物清静国家尺度食物中真菌毒素限量》尺度中也纪律了食粮中的真菌毒素B1的最大限量，凤香型酿酒质料（高粱、大麦、小麦、豌豆）中的最大限量分说为10µg／kg、5µg／kg、5µg／kg、5µg／kg。尽管如斯，但依然存在确定的危害，因此建树精确、高效的检测措施尤为紧张。

当初对于黄曲霉毒素的检测措施主要有液相色谱-荧光检测法、酶联免疫吸附筛查法、高光谱检测法、薄层色谱法、同位素稀释液质联用法等。本钻研建树了酿酒质料及白酒中AFTB1的液质联用（HPLC-MS／MS）检测法。该措施样品前处置较重大、检测功能高、精确度高、检测限更低，进一步知足了破费者对于食物清静更高的期望以及国家对于食物检测更严的要求。

1质料与措施

1.1质料、试剂与仪器

样品：质料（高粱、大麦、小麦），废品酒取自于陕西西凤酒股份有限公司。

试剂：甲酸、乙腈、甲醇、乙酸铵（合成纯）、超纯水。

仪器配置装备部署：高效液相色谱串联质谱仪，万分天平，氮吹仪，免疫亲以及柱。

尺度品：黄曲霉毒素B1（AFTB1纯度≥98%），同位素内标13C17-AFTB1（纯度≥98%）。

1.2尺度溶液的配制

AFTB1尺度蕴藏液：称取AFTB1为1.0mg，用乙腈定容至100mL容量瓶，配制成10µg／mL尺度蕴藏液。

同位素内标13C17-AFTB1使命液：精确移取0.5µg／mL的13C17-AFTB10.8mL，用乙腈定容至10mL，配制成40ng／mL的同位素内标使命液。

AFTB1系列尺度使命液：移取AFTB1尺度蕴藏液1.0mL至100mL容量瓶中，用乙腈定容，配制成100ng／mL的AFTB1中间尺度液。再分说移取AFTB1中间尺度液5µL、10µL、50µL、100µL、200µL、500µL、800µL、1000µL至10mL容量瓶中，分说加500µL的40ng／mL同位素内标使命液，用初始行动相定容，配制成浓度为0.05ng／mL、0.1ng／mL、0.5ng／mL、1.0ng／mL、2.0ng／mL、5.0ng／mL、8.0ng／mL、10.0ng／mL的系列尺度使命液，过0.22µm滤膜，待上机。

1.3仪器参数条件

液相条件：色谱柱：Shin-packXR-ODSIIIC18（2.0妹妹I.D*150妹妹L.，3.0μm）；进样量：10µL；行动相：A：0.02%甲酸-2妹妹ol／L乙酸铵，B：甲醇；柱温：40℃；流速：0.3mL／min；驻留光阴：10ms。洗脱方式：梯度洗脱，见表1。

质谱条件：扫描方式：多级反映监测（MRM）；离子源：ESI，正离子方式；加热块温度：450℃；DL温度：250℃；雾化气流速：3.0L／min；干燥气流速：15L／min；离子源接口电压+4.5；驻留光阴：10ms。

1.4试验措施

1.4.1样品提取

酿酒质料：精确称取酿酒质料5g样品于50mL离心管中，退出250µL同位素内标使命液，漩涡振荡混匀，退出20mL甲醇-水（70+30），涡旋混匀，静置30min后用均质器均质3min，过玻璃纤维滤纸。精确移取滤液4mL退出12mL的超纯水，混合平均，待传染。

酒样：称取2g酒样，退出100µL同位素内标使命液，退出4mL水，振荡混匀，待传染。

1.4.2传染

质料：待免疫亲以及柱呵护液流尽后退出上述溶液，以1滴／s的流速经由免疫亲以及柱，流完后用2×10mL超纯水淋洗免疫亲以及柱，做作重力流干后挤干小柱，精确退出2×0.5mL甲醇洗脱，再加1mL水挤干，群集于比色试管中，过0.22µm有机滤膜，待上机。

酒样：待免疫亲以及柱呵护液流尽后退出1.4.1中酒样溶液，做作重力下滴，流完后加10mL去离子水淋洗柱子，挤干；加2×0.5mL甲醇洗脱，再加1mL水挤干，群集于比色试管中，过0.22µm有机滤膜，待上机。

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